您好!欢迎登录北京酷来搏科技有限公司官方网站!

产品分类

中文名:金担子素A

英文名:Aureobasidin A

CAS:N/A

级别:

分子量:1100

分子式:C60H92N8O11

纯度:≥95%

储存条件:2-8℃

说明书下载点击下载 >>

产品编号 规格 目录价(¥) 优惠价(¥) 数量 操作
CA2332-1mg1mg12981298
CA2332-5×1mg5×1mg53985398
产品简介

不溶于水,溶于甲醇、乙醇

一、关于AbA:

金担子素A(Aureobasidin A,AbA)是从丝状真菌Aureobasidium pullulans No. R106中分离出来的环酯肽类抗生素,具有很强的抗真菌能力。AbA作用机制是抑制酵母中AUR1基因(1,2)编码的肌醇磷酰胺(inositol phosphorylceramide,IPC)合成酶的活性,干扰鞘脂合成,从而杀死菌株。AbA在较低的浓度下(0.1-0.5 μg/ml)即可对酵母产生毒性。编码IPC合成酶的基因研究较多的来自酿酒酵母菌的AUR1基因,以及构巢曲霉的AURA基因,两者具有同源性。通过对编码AUR1-C基因进行突变即可使得菌株对AbA产生抗性,作为蛋白质互作研究的报告基因。

因为AbA可以直接杀死敏感的酵母菌株,而不是延迟菌株生长,所以AbA筛选有利于阳性克隆的生长和识别。与营养报告基因(如HIS3)进行低严紧度初筛相比,AbA筛选大大消除了背景克隆。实际操作中,用AbA进行初筛时会获得更多克隆,之后再用4个报告子(AUR1-C,HIS3, ADE2 和MEL1)进行高严紧度的二次筛选以验证阳性克隆。AbA非常适合用作阳性克隆子筛选用的药物选择性标记;也是酵母单/双杂交研究中理想的报告子,可以简化酵母双杂交文库筛选。

二、使用方法:

1.本品为AbA的甲醇溶液,浓度为1 mg/ml,直接用作储存液。

2.灭菌后YPD Agar培养基(PM2020)冷却至50-55 ℃,加入适量的AbA储液,倒板备用。(AbA工作浓度取决于宿主细胞的敏感度,见下表)

3.制备酵母感受态细胞并完成转化,参考SK2400,SK2401。

4.把100 μl完成转化酵母细胞悬液涂到含有适量AbA的YPD Agar培养基平板上,30℃培养2-4天。

5.挑取克隆鉴定,或统计转化效率。

三、不同菌株建议AbA的工作浓度:

菌株

MIC(µg/ml)

S.cerevisiae

ATCC9763(diploid)

0.2-0.4

Baker’s yeast(diploid)

0.2-0.4

Beer yeast(triploid or tetraploid)

0.1

SH3328(haploid)

0.1

Shochu yeast(diploid)

0.1

Sake yeast(diploid)

0.1-0.2

C.albicans

TIMM-0136(diploid)

0.04

C.tropicalis

TIMM-0324(diploid)

0.08

Schizo.pombe

JY-745(monoploid)

0.1


四、对AbA敏感的真菌:

出牙酵母(Saccharomyces cerevisiae)、粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)、光滑念珠菌(Candida glabrata)、构巢曲霉(Aspergillus nidulans)和黑曲霉(A. niger.)。


我的购物车 (0)

京ICP备13050818号-1